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技術(shù)文章

磁珠分離技術(shù)與產(chǎn)品——ReSyn Biosciences

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ReSyn Biosciences生產(chǎn)MagReSyn系列新一代的高分子聚合物微球(微粒)產(chǎn)品,這一平臺(tái)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域科研和應(yīng)用的好幫手。
ReSyn聚合物技術(shù)生產(chǎn)高磁性的系列磁性分離、富集產(chǎn)品。MagReSyn分離產(chǎn)品用于蛋白質(zhì)組學(xué),分子和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域。另外,根據(jù)客戶需求生產(chǎn)超高荷載能力的MAX產(chǎn)品,滿足低洗脫體積的需求。
產(chǎn)品包括
1.         NTA
2.         SAX
3.         Tio2
4.         Zro2
5.         Ti-IMAC
6.         HILIC
7.         Amine
8.         Carboxyl
9.         Streptavidin
10.     Protein A
11.     Protein G
12.     Trypsin
13.     Chymotrypsin
詳情如下:
1.       MagReSyn NTA & NTA篩選試劑盒 (MagReSyn NTA & NTA Screening Kit)
用于6x 組氨酸標(biāo)簽蛋白的快速親和純化
MagReSyn NTA微顆粒具有強(qiáng)金屬螯合能力的氨三乙酸(nitrilotriacetic acid, NTA)殘基。MagReSyn NTA預(yù)先與鎳離子螯合,用于親和純化組氨酸蛋白。鑒于不同類型的組氨酸標(biāo)簽蛋白可能對(duì)不同的金屬離子親和性存在差異,ReSyn Biosciences提供系列組氨酸標(biāo)簽蛋白純化篩選試劑盒(MagReSyn NTA-KIT),產(chǎn)品為與四種不同二價(jià)金屬離子(Ni2+, Cu2+, Co2+, Zn2+)螯合的MagReSyn NTA,方便用戶找到針對(duì)自身靶蛋白的適純化方案。
2.       MagReSyn SAX
離子交換法快速實(shí)現(xiàn)蛋白分級(jí)分離(protein fractionation)
MagReSyn SAX強(qiáng)陰離子交換劑通過(guò)利用凈電荷差異來(lái)逆向吸收與自身電荷相反的分子,用于蛋白/肽,酶,抗體等生物分子的捕獲,純化和回收。這種磁性聚合微粒是血清,血漿,尿液,腦脊液(CSF),細(xì)胞裂解液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液等復(fù)雜生物樣品理想的分級(jí)分離產(chǎn)品,用在雙向電泳,HPLC和質(zhì)譜分析前處理中。這種具有荷載能力的微粒能滿足高度的濃縮需求,實(shí)現(xiàn)小洗脫體積。
3.       MagReSyn TiO2
TiO2-功能性微粒(TiO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特異性富集
蛋白磷酸化參與多種細(xì)胞過(guò)程,約30%蛋白可實(shí)現(xiàn)磷酸化修飾。很多研究聚焦于蛋白的翻譯后修飾。然而,因磷酸化肽豐度低,化學(xué)計(jì)量低和理化特性等因素,導(dǎo)致長(zhǎng)期以來(lái)蛋白質(zhì)組尺度上的磷酸化研究都是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的一個(gè)重要挑戰(zhàn)。因此,當(dāng)前迫切需要能特異富集磷酸化肽、且與質(zhì)譜分析兼容的富集技術(shù)。
MagReSyn TiO2-功能性微粒能在復(fù)雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復(fù)性富集磷酸化肽。二氧化鈦選擇性親和、富集磷酸化的絲氨酸,絲氨酸和酪氨酸。MagReSyn TiO2微粒經(jīng)工程化處理實(shí)現(xiàn)特異性大化,在同類產(chǎn)品中卓爾不群,具有*的磷酸肽回收能力。
MagReSyn TiO2微??梢詥为?dú)使用也可與MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯(lián)合應(yīng)用,富集不同類型的磷酸肽。
4.       MagReSyn ZrO2
ZrO2-功能性微粒(ZrO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特異性富集
在復(fù)雜的蛋白消化產(chǎn)物中實(shí)現(xiàn)磷酸化肽的高特異性富集是當(dāng)前蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要挑戰(zhàn)。當(dāng)前,有多種具有不同特異性和親和性的磷酸化肽分離技術(shù),這些技術(shù)或單獨(dú)或聯(lián)合,用于磷酸肽的富集、回收中。MagReSyn ZrO2微粒在復(fù)雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復(fù)性實(shí)現(xiàn)磷酸化肽的富集。MagReSyn ZrO2微粒可以單獨(dú)使用也可與MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯(lián)合應(yīng)用,富集不同類型的磷酸肽。
5.       MagReSyn Ti-IMAC
螯合了Ti4+金屬離子的磁性微粒,用于高特異性磷酸肽富集
高通量磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)分析要求與質(zhì)譜兼容的磷酸化肽特異性富集手段。MagReSyn Ti-IMAC微粒具有能與Ti4+螯合的磷酸基團(tuán)活化的彈性鏈接(減少了空間位阻)。這種性MagReSyn微粒能在復(fù)雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復(fù)性的實(shí)現(xiàn)磷酸化肽富集。MagReSyn Ti-IMAC微??梢詥为?dú)使用也可與MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯(lián)合應(yīng)用,富集不同類型的磷酸肽。
6.       MagReSyn HILIC
多模式(multi-mode) HILIC微粒,用于質(zhì)譜前樣品的清潔(cleanup)
樣品準(zhǔn)備的多種環(huán)節(jié)可能引入污染,導(dǎo)致質(zhì)譜結(jié)果多變。消化和MS分析前樣品準(zhǔn)備(清潔)的方法/工具包括色譜柱,脫鹽柱(膜)和區(qū)段用packed tips等魚貫式流程。雖然這些技術(shù)廣泛應(yīng)用,但是他們不能自動(dòng)化,或不能優(yōu)化用于平行處理而實(shí)現(xiàn)高通量。為了清潔過(guò)程的全面自動(dòng)化,ReSyn Biosciences開發(fā)了移除污染用的普適性磁性混合模式HILIC。其自動(dòng)化清潔流程減少了樣品處理步驟,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模平行樣品制備,贏得了大量客戶。
MagReSyn HILIC用于平行蛋白樣的MS分析前凈化清潔,重現(xiàn)性高,流程全面自動(dòng)化。這一產(chǎn)品可用于干擾MS分析的各種普通污染的清潔。
7.       MagReSyn Amine
伯胺功能性支持微粒,用于配體吸附或化學(xué)修飾
NH2功能性微??赏ㄟ^(guò)離子相互作用物理吸附生物分子,或通過(guò)化學(xué)功能化,利用多種雙功能化學(xué)偶聯(lián)試劑共價(jià)結(jié)合生物分子。常用于偶聯(lián)的試劑包括戊二醛(glutaraldehyde)和1,4-丁二醇二縮水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)。
8.       MagReSyn羧基(MagReSyn Carboxyl)
通過(guò)伯胺殘基共價(jià)結(jié)合,用于配體的固化
MagReSyn羧基磁性聚合微粒通過(guò)碳二亞胺-琥珀酰亞胺酯(carbodiimide-succinimidyl ester)活化和后續(xù)酰胺鍵形成來(lái)共價(jià)固化含伯胺的配體。羧基活化有多種策略,但偶聯(lián)蛋白和其它含伯胺的配體常用的方法是在水相中通過(guò)EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide)活化。這一反應(yīng)可以通過(guò)一步反應(yīng)或通過(guò)兩步反應(yīng)(添加N-hydroxysuccinimide (NHS)或更穩(wěn)定的sulfo-NHS生成中間產(chǎn)物NHS酯或sulfo NHS ester)完成。
9.       MagReSyn鏈親合素(MagReSyn Streptavidin)
強(qiáng)大的捕獲生物素化分子的能力
MagReSyn鏈親和素微粒含共價(jià)結(jié)合的鏈親合素。聚合物的多孔特性具有*的鏈親和素承載能力,使其具有*的固化/結(jié)合生物素化生物分子能力。*的鏈親和素承載力使其只需使用10 µl的微粒,提高了實(shí)驗(yàn)微型化能力,更利于高通量自動(dòng)化分析。MagReSyn鏈親和素微粒可用于蛋白的固化和純化、SELEX和焦磷酸測(cè)序用核酸捕獲和單鏈DNA模板制備。經(jīng)固化的生物素化抗體可用于后續(xù)的免疫檢測(cè)中。
MagReSyn鏈親合素MAX (MagReSyn Streptavidin MAX)
捕獲生物素化分子用具*承載力的鏈親和素磁珠
MagReSyn Streptavidin MAX根據(jù)客戶需求訂制,實(shí)現(xiàn)生物素分子結(jié)合能力的大化。滿足高通量自動(dòng)化分析微板應(yīng)用的需求。
10.   MagReSyn Protein A
抗體和免疫沉淀等親和純化用高承載力蛋白A
MagReSyn Protein A微粒共價(jià)偶聯(lián)的蛋白A能在血清樣品中高特異性、單步純化>95%的IgG。蛋白A為~56 kDa的棒狀金黃色葡萄球菌(bacterium Staphylococcus aureus)細(xì)胞壁表面蛋白,廣泛用于IgG抗體的高特異性純化和免疫沉淀中。蛋白A含5個(gè)免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域折疊形成的三螺旋束(three-helix bundle),特異結(jié)合IgG抗體的Fc區(qū)域。蛋白A特異地、高親和力結(jié)合人,兔,小鼠,豚鼠,貓和豬IgG。MagReSyn的高蛋白A承載能力使其能在實(shí)驗(yàn)中結(jié)合更多免疫球蛋白,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的微型化(experimental miniaturization)。
MagReSyn Protein A MAX
*蛋白純化和免疫沉淀能力的蛋白A
MagReSyn Protein A MAX根據(jù)客戶需求訂制,實(shí)現(xiàn)結(jié)合能力的大化。實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)微型化,滿足高通量自動(dòng)化分析微板應(yīng)用的需求。
11.   MagReSyn Protein G
抗體和免疫沉淀等親和純化用高承載力的蛋白A
MagReSyn Protein G微粒用于從生物樣品中高特異捕獲多種免疫球蛋白。重組的鏈球菌蛋白G(缺少白蛋白結(jié)合區(qū),增加了免疫球蛋白特異性)共價(jià)連接在磁性微球上,減少了漏出,讓蛋白G更穩(wěn)定,適合更廣闊的親和純化條件。蛋白G結(jié)合多種哺乳動(dòng)物免疫球蛋白,具有比蛋白A更強(qiáng)的結(jié)合能力,包括人IgG3和大鼠IgG2a。不與人IgM, IgD或IgA結(jié)合。MagReSyn高的蛋白G承載能力使其能滿足實(shí)驗(yàn)微型化需求,實(shí)現(xiàn)對(duì)血清樣品中高特異性、單步純化>95%的IgG。
12.   MagReSyn Trypsin
蛋白樣品的質(zhì)譜分析前制備,實(shí)現(xiàn)快速、自動(dòng)化胰酶消化。
MagReSyn胰酶微粒共價(jià)固化了測(cè)序級(jí)胰酶(TPCK處理阻止胰凝乳蛋白酶活性),用于質(zhì)譜分析前的蛋白消化。多孔的MagReSyn承載能力強(qiáng),使其具有高的酶活性,快速實(shí)現(xiàn)胰酶消化。這種固化胰酶的性質(zhì)穩(wěn)定,能在變性條件下(包括尿素和SDS條件)保持活性,自溶性有限,實(shí)現(xiàn)了消化流程的自動(dòng)化和微型化,提高了消化的重現(xiàn)性。
13.   MagReSyn Chymotrypsin
快速,自動(dòng)化實(shí)現(xiàn)質(zhì)譜前蛋白樣品的胰凝乳蛋白酶消化
MagReSyn Chymotrypsin微粒由共價(jià)固化的測(cè)序級(jí)胰凝乳蛋白酶(TLCK處理阻止胰酶活性)用于質(zhì)譜分析前的蛋白消化。多孔MagReSyn具有的高承載能力,消化能力高,實(shí)現(xiàn)了快速消化。磁珠固化的胰凝乳蛋白酶能自動(dòng)化,微型化消化流程,提高實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性。胰凝乳蛋白酶對(duì)疏水殘基切割能力強(qiáng),與MagReSyn Trypsin蛋白消化覆蓋力互補(bǔ)。

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